JOL:张继泉/孙玉英课题组成功解析了中华锯齿米虾表皮钙化的分子机理

 甲壳动物具有保护自身的坚硬表皮,而且需要周期性的蜕皮来完成生长发育,蜕皮过程贯穿于整个生命周期。甲壳动物蜕皮的发生受环境因子、内分泌调节和基因表达的影响。蜕皮周期的每个阶段都影响着外骨骼的形成和钙化,外骨骼由几丁质、蛋白质和含钙物质构成,它的物理特性主要由所含表皮蛋白的种类所决定,随着发育阶段和组织部位的不同存在很大的差异性,这种差异性的形成很可能与钙化过程有很大联系。

 张继泉/孙玉英课题组以中华锯齿米虾为研究对象,通过对其基因组和转录组的分析,获得了两个可能参与表皮钙化的钙相关表皮蛋白基因NdCAP-1NdCAP-2。根据中华锯齿米虾米虾尾扇的显微结构确定了其蜕皮阶段(A-B期、C期、D0-1期和D2-4期)(图1),明确了NdCAP-1NdCAP-2基因在头胸部表皮、步足、泳足和尾扇的时空表达模式,NdCAP-1基因只在D2-4期表达,NdCAP-2基因在D2-4期和A-B期都有表达,且两个基因在头胸甲和步足的表达比在泳足和尾扇显著(图2)。用双链RNA干扰方法,揭示了NdCAP-1NdCAP-2基因受NdEcR基因介导的信号通路的调控。敲降NdCAP-1基因后,D2-4期米虾的步足刚毛伸展不流畅,出现卷曲。敲降NdCAP-2后,A-B期米虾的步足表面凹凸不平,出现了大面积的褶皱(图3)。进一步利用体外重组表达制备了重组蛋白rNdCAP-1rNdCAP-2,钙结合能力实验鉴定出rNdCAP-1rNdCAP-2蛋白的钙结合能力分别为:0.16 moL Ca2+/moL rNdCAP-10.175 moL Ca2+/moL rNdCAP-20.45 mg/mL rNdCAP-1rNdCAP-2可以抑制钙沉淀的形成;rNdCAP-1rNdCAP-2蛋白的几丁质结合实验显示rNdCAP-1rNdCAP-2蛋白具有几丁质结合能力。从而确定了钙相关表皮蛋白基因NdCAP-1NdCAP-2参与了甲壳动物表皮的钙化过程。

 上述成果于2024年6月发表在Journal of Oceanology and Limnology上。河北大学生命科学学院2020级硕士研究生高茜为论文第一作者,张继泉研究员和孙玉英教授为通讯作者。论文得到国家自然科学基金、河北省重点研发计划以及河北省自然科学基金等资助。

 

论文信息:Gao X, Duan MM, Sun YY*, Zhang JQ*. 2024. Molecular cloning and functional analysis of two calcium-associated cuticular protein genes in Neocaridina denticulata sinensis. Journal of Oceanology and Limnology(中科院二区), Doi: 10.1007/s00343-024-3211-0.

1 中华锯齿米虾蜕皮周期各阶段的尾扇显微结构

a)蜕皮后期A期;(b)蜕皮后期B期;(c)蜕皮间期C期;(d)蜕皮前期D0-1期;(e)蜕皮前期D2-4期。

 

2 NdCAP-1NdCAP-2基因在米虾蜕皮周期不同组织的表达模式

1:头胸甲,2:步足,3:泳足,4:尾扇。

 

3 敲降NdCAP-1NdCAP-2基因后的表型变化

a)(c)对照组;(b)敲降NdCAP-1基因;(d)敲降NdCAP-2基因

 

上一篇:STOTEN:张继泉/孙玉英课题组阐释了中华锯齿米虾膜结合型海藻糖酶基因响应不利环境胁迫的分子机制

下一篇:Biology:张继泉/孙玉英课题组首次利用PacBio SMRT完成了中华锯齿米虾多组织全长转录组测序

书记信箱

院长信箱 jiangyon...

图书馆

教务系统

办公系统

诚聘英才